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使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)系統(tǒng)制備小鼠心臟細(xì)胞片的實(shí)驗(yàn)方法

標(biāo)簽：生物反應(yīng)器成纖維細(xì)胞科普胰蛋白酶實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備和實(shí)驗(yàn)方法1.動(dòng)物和試劑野生型C57BL/6小鼠。以下抗體用于免疫細(xì)胞化學(xué)：抗肌節(jié)α-肌動(dòng)蛋白(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、抗心肌肌鈣蛋白T和抗肌球蛋白重鏈小鼠單克隆抗體和豚鼠單克隆抗波形蛋白抗體。除非另有說明，試劑品牌選用Sigma。2.小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)維持在α-肌球蛋白重鏈啟動(dòng)子控制下表達(dá)EGFP的小鼠ES細(xì)胞。R1ES細(xì)胞普遍表達(dá)EYFP、在α-肌球蛋白重鏈啟動(dòng)子和潮霉素抗性基因上游的磷酸甘油酸激...

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CRISPR 激活與干擾篩選技術(shù)原理

在自身免疫、免疫缺陷和癌癥中，受刺激的T細(xì)胞中細(xì)胞因子產(chǎn)生的調(diào)節(jié)可能會(huì)被破壞。刺激依賴性細(xì)胞因子調(diào)節(jié)劑的系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)需要功能喪失和功能獲得研究，這在人類原代細(xì)胞中一直具有挑戰(zhàn)性。通過報(bào)告人類原代T細(xì)胞中的全基因組CRISPR激活(CRISPRa)和干擾(CRISPRi)篩選，以識(shí)別控制白介素-2(IL-2)和干擾素-γ(IFN-γ)產(chǎn)生的基因網(wǎng)絡(luò)。CRISPR激活與干擾篩選技術(shù)概述《科學(xué)》雜志中關(guān)于CRISPR激活、篩選有新進(jìn)展，CRISPR激活(CRISPRa)和CRISPR干...

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活細(xì)胞成像系統(tǒng)對(duì)顯微鏡的要求

在設(shè)計(jì)用于活細(xì)胞成像研究的光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)時(shí)，主要考慮因素是檢測(cè)器靈敏度（信噪比）、所需的圖像采集速度和樣本活力。在使用活細(xì)胞時(shí)，必須嚴(yán)格避免在記錄固定細(xì)胞和組織的圖像時(shí)通常使用的相對(duì)較高的光強(qiáng)度和較長(zhǎng)的曝光時(shí)間（其中光漂白是主要考慮因素）。幾乎在所有情況下，活細(xì)胞顯微鏡都代表了實(shí)現(xiàn)較佳圖像質(zhì)量和保持細(xì)胞健康之間的折衷。原則上，理想的活細(xì)胞圖像采集系統(tǒng)應(yīng)該足夠靈敏，可以從弱熒光標(biāo)本中采集優(yōu)質(zhì)圖像，同時(shí)足夠快以記錄所有動(dòng)態(tài)過程。此外，該系統(tǒng)將具有足夠的分辨率來捕捉精細(xì)的樣本細(xì)節(jié)和...

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納米電子生物傳感器的應(yīng)用與特點(diǎn)

納米電子生物傳感器是納米結(jié)構(gòu)的半導(dǎo)體材料，或?qū)㈤_啟生物工程科技新時(shí)代旨在解決納米分子的問題，以促進(jìn)細(xì)胞水平生物活動(dòng)的適當(dāng)解決方案。在過去的二十年中，出現(xiàn)了一些研究努力，以實(shí)證研究納米電子生物傳感器在醫(yī)學(xué)中的能力。當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究中納米電子生物傳感器的出現(xiàn)很大程度上受到了將電子學(xué)與醫(yī)學(xué)干預(yù)相結(jié)合的研究努力的影響。如今，非常需要在生物分子和細(xì)胞水平上治療疾病；然而，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)以前的醫(yī)學(xué)知識(shí)和技術(shù)在這樣做時(shí)效率低下。因此，針對(duì)分子水平的機(jī)器成為一種需求。這些生物電子機(jī)制應(yīng)該為檢測(cè)目標(biāo)分子...

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單克隆抗體技術(shù)原理及培養(yǎng)條件

標(biāo)簽：?jiǎn)慰寺】贵w技術(shù)生物反應(yīng)器抗體是具有免疫活性的糖蛋白結(jié)構(gòu)。當(dāng)它們識(shí)別細(xì)菌、病毒或腫瘤細(xì)胞等異物時(shí)，它們能夠識(shí)別或誘導(dǎo)中和免疫反應(yīng)。免疫球蛋白由B淋巴細(xì)胞響應(yīng)抗原的存在而產(chǎn)生和分泌。目前，單克隆抗體技術(shù)(mAb)主要是從這些細(xì)胞的培養(yǎng)中產(chǎn)生的。其需求的培養(yǎng)條件如下：培養(yǎng)基的要求哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基必須含有復(fù)雜的成分，從氨基酸到微量元素。為了滿足細(xì)胞對(duì)這些營養(yǎng)素的需求，培養(yǎng)基在其成分中使用血清，然而，由于缺陷朊病毒引起的疾病的出現(xiàn)，例如牛海綿狀腦炎(BSE)，因此有很大的動(dòng)機(jī)...

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